注射用複方葒草凍乾粉針中藥性含量測定研究

注射用複方葒草凍乾粉針中藥性含量測定研究

　　中藥具有成分複雜多變,活性成分多,藥效成分和毒性成分不甚明確等特點,為產品的質量控制帶來了困難,因此在中藥現代化的研究過程中,必須重視質量控制與療效評價標準的研究相結合。為了提高注射用複方葒草凍乾粉針的質量評價標準,我們以小鼠凝血時間試驗對其生物活性測定方法進行了研究,該法具有較好的精密度、重複性和適用性好,且操作方便、經濟安全,可以作為本品質量控制的指標。

　　1.實驗材料

　　1.1供試藥物

　　鹽酸川芎嗪(091103A3,哈爾濱三聯藥業有限公司),注射用複方葒草凍乾粉針 (20100105,由貴陽醫學院貴州省藥物製劑重點實驗室製備)。

　　1.2動物

　　健康昆明種小鼠,體重18-22g,雌雄各半,由貴陽醫學院實驗動物中心提供（合格證號:SCXK(黔)2002-0001）。

　　2.方法

　　昆明小鼠,體重18～22g,雌雄各半,尾靜脈注射給藥,於末次給藥30min後,用眼科彎鑷迅速摘去一側眼球,於潔淨載玻片兩端各滴一滴血,血滴直徑均5mm,立即用秒錶計時,每隔30s用清潔大頭針自血滴邊緣向裡輕輕撥動一次,並觀察有無血絲挑起,記錄採血開始至挑起血絲止所歷時間,即為凝血時間,另一滴血供最後複驗。將每組資料進行t檢驗,計算凝血時間延長率。

　　3.統計方法

　　結果用均數±標準差（x-±s）表示,所有資料採用SPSS13.0版軟體進行t檢驗，P<0.05有統計學意義。

　　4.結果

　　4.1 限值劑量研究

　　注射用複方葒草凍乾粉針劑量為6.8g/kg、13.5g/kg連續三次給藥可明顯延長小鼠的.凝血時間,其延長率分別為19.72%和23.43%，與正常對照組比較有顯著性差異（p<0.05）,為了增加可靠性和保證重複性,選用劑量13.5g/kg（相當於人臨床用量的30倍）作為限值劑量。(經預試驗，各劑量組單次給藥作用不顯著。)

　　4.2 方法學驗證

　　4.2.1 重複性實驗

　　取同一批號注射用複方葒草凍乾粉針進行6次平行測定試驗(13.5g/kg),6次試驗均可顯著延長小鼠的凝血時間,與正常對照組比較有顯著性差異（p<0.05），表明本方法重複性較好。

　　4.2.2 精密度實驗

　　同實驗室不同實驗人員採用注射用複方葒草凍乾粉針以13.5g/kg尾靜脈注射給藥後進行測定,均可顯著延長小鼠的凝血時間,與正常對照組比較有顯著性差異（p<0.05）,其延長率分別為23.63%,19.76%,表明本方法精密度較好。

　　4.2.3 方法適用性考察

　　表2 不同批次注射用複方紅草凍乾粉針小鼠凝血時間生物活性測定結果 組別批號動物數（只）劑量(g/kg?d)凝血時間(s)延長率(%) 對不同批號的10批註射用複方紅草凍乾粉針進行生物活性測定,與正常對照組,均具有顯著延長小鼠凝血時間的作用（p<0.05）,不同批號之間生物活性無顯著性差異,表明本方法適用性好。